Pramoninės chromatografijos stulpelis

AniNDURALcHromatografijacOLumonasyra įrankis, naudojamas cheminei analizei, kuri atskiria mišinio junginius ir išmatuoja kiekvieno junginio kiekį ., jis plačiai naudojamas naftos chemijos, farmacijos, maisto pramonės, aplinkos apsaugos ir kitose srityse, skirtoms atskyrimui, valymui ir aptikimui ., ji veikia pagal paskirstymo balansą ir judant skirtingoms medžiagoms. Stacionarios fazės ir mobiliosios fazės . chromatografinėje analizėje mėginys praeina per kolonėlę, kur fiksuotos fazės ir mobiliosios fazės charakteristikos leidžia įvairiems junginiams praeiti per kolonėlę skirtingais greičiais, tokiu būdu pasiekiant atskyrimą ., tada šiuos junginius galima nustatyti ir kiekybiškai išanalizuoti nustatymą {}.}}}.

The separation effect of the column depends on the stationary phase selected, as well as the preparation and operating conditions of the column. Common packing materials for distribution columns include carbon octane column (ODS/C18), carbon octane column (MOS/C8), carbon Hexyl/C6, carbon quaternary column (Butyl/C4), carbon Methyl/C1, anion exchange Stulpelis (SAX), katijonų mainų stulpelis (SCX), fenilo kolonėlė (fenilas), amino stulpelis (A) Mino/NH2), ciano/cn/nitrilas ir kt. .

Pramoninės chromatografijos stulpeliuose yra daugybė programų daugelyje laukų, įskaitant:

Biofarmacijos:Chromatografinė stulpelis yra pagrindinė biofarmacijos atskyrimo ir gryninimo priemonė, naudojama didelio grynumo ir didelio aktyvumo biologinių produktų gamybai . gamybai gaminti
Maisto sauga:Naudojamas kenksmingų medžiagų, tokių kaip priedai ir likučiai, aptikti maiste, kad būtų užtikrintas maisto sauga .
Aplinkos stebėjimas:Aplinkos aplinkos ir aplinkos kokybės įvertinimo atskyrimas ir analizė .
Naftos chemija:Naftos produktų grynumo aptikimas, priemaišų analizė ir tt .

Daugelyje sričių, tokių kaip pramoninė analizė, aplinkos stebėjimas, narkotikų tyrimai ir plėtra, chromatografinė stulpelis yra pagrindinė atskyrimo priemonė, o jo veikimas tiesiogiai veikia analitinių rezultatų tikslumą ir patikimumą .. Chromatografiniai stulpeliai, siekiant pateikti naudingą nuorodą susijusių laukų tyrėjams .

Stulpelių pakavimo tipas

Kolonų užpildų pasirinkimas yra platus, o pagal skirtingas pagrindines medžiagas jis gali būti padalytas į neorganinius užpildus, organinius užpildus ir biologinius užpildus . kiekvienas užpildymas turi savo unikalias fizines ir chemines savybes ir taikymo sritį .

Neorganinis užpildas

Neorganiniai užpildai yra žinomi dėl savo didelio mechaninio stabilumo, aukštos temperatūros stabilumo ir rūgščių bazės stabilumo, ir yra tinkami reikalaujančioms atskyrimo sąlygoms . įprasti neorganiniai užpildai yra silikagelis, aliuminio oksidas, grafituota anglies ir cirkonio .

Silikagelis yra vienas iš dažniausiai naudojamų neorganinių užpildų, o jo paviršius turi poliarines funkcines grupes, tokias kaip silicio hidroksilo grupė (SIOH), kuri yra tinkama normaliai fazės chromatografijai ir atvirkštinės fazės chromatografija . normalios fazės chromatografijos, silicio gele yra naudojama kaip klinlus fazė, o pooled komponentai yra plaunami. Pirmiausia . Atvirkštinės fazės chromatografijoje silikagelio paviršiaus surišimas turi palyginti silpną funkcinių grupių, tokių kaip C18, C8 ir tt, poliškumas, pavyzdžiui, C18, C8 ir kt.

Aliuminis oksidas taip pat yra savotiškas neorganinis užpildas, o jo dalelės yra standžios ir gali būti paverčiamos stabilia chromatografine kolonėlės lova . aliuminio oksido užpildas yra tinkamas mobiliajai fazei, kurios pH yra iki 12, tačiau jo taikymo diapazonas yra ribotas dėl stipraus veiksmo su alkaliniais junginiais.

Graphitized Carbon yra naujo tipo neorganinis užpildas, kurio paviršius yra sulaikymo pagrindas be jokio kito paviršiaus modifikavimo . grafitizuotų anglies užpildų pagrindas yra stipresnis sulaikymo pajėgumas nei alkilo surišti silikagelis arba porėtiniai polimerų užpildai. Jie yra tinkami atskirti tam tikrus geometrinius izomerus ., papildomai. būti naudojami bet kokiu pH ir temperatūra .

Cirkonijos užpildas yra vienas iš naujų neorganinių užpildų, ištirtų pastaraisiais metais ., tai yra komercinis porėto cirkonio mikrosferos kolonėlė, kurios polimerų danga yra tik . cirkonio užpildas, tinkamas pH diapazonui 1 ~ 14, temperatūra iki 100 laipsnių, turi plačią taikymo perspektyvą .}}}

 

Organiniai užpildai

Organiniai užpildai daugiausia apima polimerų užpildus, tokius kaip polistyreno-divinilbenzenas, polimetilpropionatas ir panašiai . tokių užpildų gali būti naudojami pH diapazone nuo 1 iki 14 ir turi stipresnį hidrofobiškumą. polimerų užpildų, turinčių dideles poras, yra labai veiksmingi biologinių macomoolių atskyrimui, kaip tokie, kaip tokie biologiniai macomooliai, tokie tokie, kokie yra tokie, kaip biologiniai macomooliai, tokie tokie, kaip biologiniai macomooliai, tokie tokie, kokie yra tokie, kaip biologiniai macomooliai, tokie tokie, kaip biologiniai macomoolio kiekiai, tokie kaip biologiniai macomolecules. Baltymai . Be to, organiniai užpildai turi gerą cheminį ir šiluminį stabilumą ir yra tinkami įvairioms atskyrimo sąlygoms .

 

Biologiniai užpildai

Biological fillers are mainly suitable for the analysis of biological macromolecules, such as proteins or nucleic acids. Common biological fillers include polysaccharide derivatives stationary phase column, cyclodextrin column and protein chiral column. These fillers enable efficient separation using the interaction forces between biomolecules.

Tinkamo stulpelio pakavimo pasirinkimas yra raktas, siekiant užtikrinti chromatografijos atskyrimo efektą . Renkantis užpildus, reikia atsižvelgti į šiuos veiksnius:

 Atskyrimo režimas

According to the properties of analytes, the suitable chromatographic separation mode is selected. Common chromatographic separation modes include reversed phase chromatography (RPC), normal phase chromatography (HILIC), ion exchange chromatography (IEC), Affinity chromatography (Affinity) and gel permeation chromatography (GPC). Skirtingi atskyrimo režimai turi skirtingus užpildų reikalavimus, pavyzdžiui, atvirkštinės fazės chromatografija paprastai pasirenka nepolinius užpildus, pagrįstus silikagelio ar polimero, o normalios fazės chromatografija pasirenka polinius užpildus .

 Fiksuota fazė ir mobilioji fazė

Stacionarios fazės pasirinkimas priklauso nuo analitės {. poliškumo, molekulinio dydžio ir struktūros poliarinėms medžiagoms, galima pasirinkti poliarinius užpildus, tokius kaip silikagelis ir hidrofiliniai stulpelių užpildai; Nepolinėms medžiagoms galima pasirinkti ne polinius užpildus, tokius kaip hidrofobiniai kolonų užpildai .. Tuo pačiu metu mobiliosios fazės poliškumas taip pat turi atitikti fiksuotą fazę, kad būtų užtikrintas geras atskyrimo efektas ., pavyzdžiui, normalioje fazės chromatografijoje, mobiliojo fazės poliarijai; Atliekant atvirkštinę fazės chromatografiją, mobiliosios fazės poliškumas yra stipresnis .

 Dalelių dydis ir diafragma

Užpildo dalelių dydis tiesiogiai veikia kolonėlės efektyvumą ir mėginio apkrovos talpą . smulkiagrūdžių užpildų gali užtikrinti didesnį kolonėlės efektyvumą, tačiau gali padidėti atgalinio slėgio; Šiurkščiavilnių pakuotė yra naudinga imties apkrovai, tačiau kolonėlės efektyvumas yra mažas ., todėl užpildų pasirinkimas turi būti subalansuotas atsižvelgiant į faktinius atskyrimo poreikius ., be to, o mažų porų dydis, o didelio porų dydžio, didelio porų dydžio, didelio porų dydžio, o didelių porų dydis yra didelis, kad būtų galima susilaikymo laiką ir atrankos, o didelio porų dydžio, didelio porų dydžio, yra naudingas, kad būtų galima sulaikyti ir selektyviai, o dideliam analijai ir selekcijos. Porų dydžio užpildai yra naudingi siekiant pagerinti mažų molekulinių junginių sulaikymą .

 Cheminis stabilumas

The selected filler should be chemically stable under analytical conditions and not react with the sample or mobile phase. This is the basis to ensure the accuracy and reliability of the chromatographic separation effect. For separation under high temperature, high pressure or strong acid and alkali conditions, it is necessary to select a filler with higher chemical stability.

 Prekės ženklas ir kaina

Skirtingi stulpelių užpildų prekės ženklai gali skirtis, tačiau taip pat reikia atsižvelgti

► Monokloninių antikūnų (MAB) valymas biofarmacijos metu

Fonas

A global biotech company aimed to scale up the purification of a therapeutic monoclonal antibody (mAb) from a 50 L pilot batch to a 1,000 L commercial batch. The challenge was to maintain >99% grynumo, tuo pačiu sumažinant agregato formavimąsi ir ląstelių baltymų šeimininko (HCP) užterštumą .

Metodika

Stulpelio dizainas:

300 mm vidinio skersmens (ID) × 500 mm nerūdijančio plieno kolonėlė, supakuota su baltymų A afinite

Maksimalus veikimo slėgis: 3 juosta .

Proceso parametrai:

Surišimo buferis: 20 mm natrio fosfatas, pH 7.4.

Exution Buferis: 0,1 M citrinos rūgštis, pH 3.0.

Srauto greitis: 150 ml/min (tiesinis greitis: 100 cm/h) .

Automatizavimas:

Integruoti vieno naudojimo jutikliai, skirti pH, laidumui ir UV aptikimui (280 nm) .

Automatizuotas valymas vietoje (CIP) su 0 . 5 M NaOH.

Rezultatai

Išeiga: 85% (1 020 g MAb iš 1 200 g žalios pašaro) .

Grynumas: 99 . 5% (HPLC analizė).

Suvestinis turinys:<1% (size-exclusion chromatography, SEC).

HCP sumažinimas: nuo 50, 000 ppm iki<5 ppm (ELISA assay).

Pagrindiniai takeliai

Mastelio keitimas: 1 . 67 stulpelio L/D santykis (ilgis ir skersmuo) užtikrino nuoseklų našumą tarp skalių.

Dervos gyvavimo ciklas: baltymo A derva išgyveno 100 ciklų su CIP, sumažindama vienos partijos sąnaudas 30%.

Automatizavimas: realiojo laiko stebėjimas Sumažinta rankinė intervencija 70%, pagerinant proceso patikimumą .

Praktiniuose pritaikymuose, pasirinkus tinkamą stulpelio pakavimą, reikia atkreipti dėmesį į šiuos taškus, kad būtų užtikrintas chromatografinio atskyrimo efektas:

 Sertifikuotas skaitykite stulpelio instrukcijos vadovą

Prieš naudodami naują stulpelį, turėtumėte atidžiai perskaityti jo instrukcijas, kad suprastumėte užpildo pobūdį, Naudojimo sąlygas ir techninės priežiūros metodus . Tai padeda užtikrinti tinkamą stulpelio naudojimą ir prailginti jo aptarnavimo tarnavimo laiką .

 Naudokite gerai užpildytą stulpelį

Įsitikinkite, kad stulpelis yra gerai užpildytas, nėra burbuliukų, jokių įtrūkimų ir kitų defektų . Tai padeda užtikrinti chromatografinio atskyrimo efekto nuoseklumą ir tikslumą .

 Sumažinkite streso svyravimus

Chromatografinio atskyrimo procese reikia sumažinti slėgio svyravimus, kad būtų išvengta mechaninių ir šiluminių smūgių . Tai padeda apsaugoti kolonų užpildus ir prailginti jų tarnavimo laiką .

 Naudokite apsauginius stulpelius ir internetinius filtrus

Norint apsaugoti kolonų užpildus nuo užteršimo ir pažeidimų, galima naudoti apsauginius kolonėles ir linijinius filtrus . Tai padeda išfiltruoti priemaišų daleles ir stipriai išlaikytus komponentus mėginyje ir mobiliojoje fazėje .

 Dažnai nuplaukite kolonėlę stipriu tirpikliu

Reguliarus kolonėlės praplovimas stipriu tirpikliu gali pašalinti priemaišas ir teršalus, likusius užpildo paviršiuje, ir išlaikyti gerą jo atskyrimo efektyvumą .

 Visiškai filtruokite mėginį ir mobilią fazę

Prieš švirkščiant mėginį ir mobilią fazę į stulpelį, jis turėtų būti visiškai filtruojamas, kad priemaišų dalelės būtų pašalintos ., tai padeda išvengti užsikimšimo ir sumažinto atskyrimo efekto .

 Valdykite stulpelio temperatūrą

Stulpelio naudojimo temperatūra daro didelę įtaką jo atskyrimo efektui . normalioms aplinkybėms, kolonėlės temperatūra turėtų būti mažesnė nei 40 laipsnių . stulpeliams su silikagelio matrica, norint išvengti fazės, pH vertė ir sumažėja.

Populiarus Žymos: Pramoninės chromatografijos stulpelis, Kinijos pramonės chromatografijos stulpelių gamintojai, tiekėjai, gamyklos